Spherisorb色譜柱的清洗、再生和存放
A. 清洗與再生
如果發生峰形改變、峰分叉、出現肩峰、保留時間改變、分離度變化或柱壓升高，說明色譜柱可能已被污染。更換當前使用的保護柱通常可以恢復色譜柱的性能。如果色譜柱性能未恢復(或者您沒有使用保護柱)，請遵循下文詳述的程序操作。為防止潛在的污染影響檢測器性能，建議清洗期間斷開所有檢測器與色譜柱洗脫液的連接。對任何清洗程序來說，反轉通過色譜柱的液流方向(反沖)都可能提升清洗效率。
1、反相色譜柱
通常情況下，用純有機溶劑進行沖洗(小心避免緩沖液出現沉淀)就足以去除大部分污染物。如果沖洗不能解決問題，可采用以下清洗和再生步驟沖洗色譜柱。請根據樣品和/或您認為污染色譜柱的物質的性質，選擇與之匹配的常規清洗方法(見表4)。用20倍柱體積(例如對于4.6 x 250 mm色譜柱，使用80 mL溶劑)HPLC級溶劑沖洗色譜柱。將流動相溫度升至35-55℃可以提高清洗效率。如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差，請致電當地的沃特世辦事處獲得更多支持。
2、正相色譜柱
要再生色譜柱，請泵送20-30倍柱體積的二氯甲烷和異丙醇通過色譜柱。也可以基于疑似污染物選用其他清洗溶劑，例如*(THF)。
保護柱需要根據樣品污染情況定期更換。當系統背壓穩步上升至設定壓力限值時，通常表明需要更換保護柱。突然出現分叉峰也表明需要更換保護柱。
B.存放
將色譜柱完全密封，防止柱床因溶劑蒸發而變干。
1．反相色譜柱
如果色譜柱需要在室溫下存放超過四天，應使用100%乙腈在室溫下保存色譜柱(氰基的色譜柱除外)。對于高溫應用，請在使用后立即使用100%乙腈保存色譜柱，以便盡可能延長色譜柱使用壽命。
切勿使用緩沖鹽洗脫液保存色譜柱。如果流動相中含有緩沖鹽，存放前先用10倍柱體積(常規色譜柱體積請參閱表2)的HPLC級水/有機溶劑沖洗色譜柱，然后用100%乙腈替換柱內的水。如果不執行這個中間步驟，在引入100%乙腈時，色譜柱內可能會出現緩沖鹽沉淀。
注：上述儲存建議的例外是用于反相方法的氰基色譜柱，這些色譜柱不應儲存在100%中等極性溶劑中(乙腈、甲醇、異丙醇)。將CN-RP色譜柱儲存在0.1M乙酸銨/乙腈中 50/50。
2.正相色譜柱
為了能在啟動時快速平衡色譜柱，請使用常用流動相保存正相色譜柱。完全密封色譜柱避免柱床蒸發和干燥。
